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            熒光濾光片的作用和怎么選擇濾光片波段?

            2020-05-14 21:00:44 @CJ-NMOT 495

            在熒光光譜測試中濾光片的作用以及怎么選擇濾光片波段呢?

            熒光濾光片在熒光檢測系統,生命科學儀器的關鍵元件,我們習慣熒光系統的各種濾光片統稱為熒光濾光片,該鏡片是由3個不同的濾光片組成的,主要有有激發濾光片,透過(發射)濾光片和二向色濾光片組成的。其中激發濾光片及發射濾光片是窄帶通型濾光片,光譜是較窄的通帶,一般8nm-10nm左右。主要是為了獲得熒光能量或獲得熒光成像,熒光濾光片特點是對干擾光的隔離度好,自發熒光干擾少。目前廣泛用于PCR分析儀,熒光免疫分析儀,熒光顯微鏡等各種醫療分析和檢測儀器中都會用到熒光濾光片。


            激發濾光片的作用:

            在熒光檢測系統中,激發熒光的波長可通過的濾光片,現在采用帶通濾光片,用于生命科學和生物醫學領域,主要作用是在生物醫學熒光檢驗分析系統中分離和選擇物質的溦發光與發射光的特征波段光譜。


            發射濾光片的作用:

            發射濾光片選擇并傳輸樣本發出的熒光特征,其他波段光線截止。發射光的波長比激發光的波長要長。我們選擇熒光發射濾光片可以選擇帶通濾光片或者長波通濾光片作為發射濾光片。


            二向色濾光片的作用:

            或稱二色鏡或分色鏡,在檢測系統的光路呈45°角放置。二向色濾光片反射一種激發光并且透射發射光,激發光的反射率大于90%,發射光的透射率大于90%。光譜中不能透過的部分被反射而不是被吸收,濾光片在透射光和反射光下的顏色互為補色,因而又稱二向色濾光片。

            熒光濾光片的工作原理

            通道熒光探針EX激發濾光片波長(nm)EM發射濾光片波長(nm)DM二向色鏡(nm)
            綠色FAM492518505
            FITC(Fluorescein)495519507
            Alexa Fluor 488499520510
            黃色JOE520548534
            VIC538554546
            HEX533559546
            TET521542532
            CAL Flour Orange 560538559549
            橙/紅ROX578604591
            Cy3554566560
            Cy 3.5578591585
            Alexa Flour 568578603591
            深紅Cy5649666658
            Quasar 670647670569
            Alexa Flour 633632647640
            Cy5.5672690681
            Cy7753775764
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            熒光濾光片濾光片選型的一般原則是在成像端盡可能讓熒光,發射光透過,同時盡可能阻擋激發光,從而獲得高信噪比信號。一般會建議激發濾光片和發射濾光片的透射光譜有一定的距離,納宏光電推薦選擇8nm-12nm帶寬。

            我們在判斷濾光片的參數一般會看透射率光譜,但往往熒光相對于激發光的強度非常弱,因此選擇濾光片更需要參考阻擋深度光譜圖,OD值,OD值更能直觀地反映濾光片對光的阻擋特性。在選擇激發濾光片和發射濾光片時,兩者的阻擋深度光譜交點(OD交點)是重要的判斷標準,一般要求寬場光源激發時交點OD值大于5,激光激發時大于OD6,以實現較好的熒光信噪比。

            深圳納宏光電生產的熒光濾光片組,具有以下濾光片特點:

            波長精準;

            高信噪比;

            深截止度;

            高可靠性;

            產品定制化程度高;

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